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01 背景
心肌梗死、心肌病、血流動力學(xué)負荷過重、炎癥等任何原因引起的心肌損傷,均可造成心肌結(jié)構(gòu)和功能的變化,導(dǎo)致心室泵血和(或)充盈功能低下,最終誘發(fā)心力衰竭。
心力衰竭的主要臨床表現(xiàn)為呼吸困難、乏力,以及肺瘀血和外周水腫。心力衰竭的發(fā)病機制和干預(yù)治療的研究還遠遠不能滿足臨床要求,這就需要建立成熟穩(wěn)定的心力衰竭動物模型來了解疾病進程以及研究新的治療方法。
02 實驗材料和方法
實驗材料:1. SD大鼠(雄性,180-220g)2.異氟烷 3.動物呼吸機 4.通用型小動物麻醉機
造模方法:1、適應(yīng)性喂養(yǎng)7天,運用異氟烷和脂肪乳混合做成乳化異氟烷的方式,腹腔注射麻醉大鼠。2、頸部剪開,鈍性分離出氣管,經(jīng)口插管,連接呼吸機,用先調(diào)整好的參數(shù)(大鼠呼吸頻率80,吸呼比1:1,潮氣量6.4) 鈍性分離胸腔左側(cè)肌肉,暴露肋間,從第3肋和第4肋間撕開肌肉,暴露心臟,輕輕撕開一點心包膜,用6-0帶線縫合針于左心耳與動脈圓錐之間進針,心電圖ST抬高表示結(jié)扎成功,之后縫合好肋間肌肉和胸腔肌肉,過5-10分鐘撤掉呼吸機,待老鼠恢復(fù)自主呼吸,放置于籠內(nèi)。3造模完成之后4-8周取材心臟組織。
評價指標:血清指標ELISA檢測,Masson染色
03 模型驗證
◆ Masson染色
Masson染色結(jié)果:正常組大鼠心肌組織基本呈紅色,無明顯藍色膠原纖維化組織。模型組心肌纖維化較嚴重,大量膠原纖維增生,可見大片藍色心肌膠原沉積于心肌細胞及血管周圍。
◆ HE染色
HE染色結(jié)果:正常組大鼠心肌纖維排列整齊有序,心肌細胞形態(tài)正常、輪廓清晰。模型組心肌細胞肥大、胞質(zhì)腫脹,邊界模糊不清,排列紊亂,細胞間隙明顯增寬,有炎性細胞浸潤,間質(zhì)內(nèi)可見毛細血管擴張增生。且心肌細胞損傷嚴重,呈小灶狀或片狀壞死。
◆ 血清指標ELISA檢測
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